藥毒所107年報
36 2018 Annual Report 圖 27. 細菌類產品之 RAPD-HRM 圖譜 ( 枯草桿菌 Y1336 、 WG6-14 、以及液化澱粉芽孢桿菌 PMB01 、 A1 、 Tcba05 、 BACY) 。 (A) ~ (D) 分別使用 OPA10 、 OPA3 、 OPE3 、 P5 不同的引子,在所有測試的細菌類 產品中,恰巧都得到 3 種型態的 RAPD-HRM 圖譜,圖譜右方為電泳結果。 應用檢驗新技術強化市售微生物農藥之管理 產品鑑定是農藥登記管理的首要條 件,化學農藥如此,微生物農藥亦不例 外,只是依化學農藥及生物農藥本質的不 同,鑑定方法也有所不同。微生物與所有 生物一樣都具有特定遺傳訊息之 DNA , 微生物的鑑定方法中,除了以顯微鏡觀 察外觀或染色分類,也利用生化法及免 疫法等表現型的方法 (phenotyping) ,近 年來常用 DNA 做為基因型分類的方法 (genotyping) ,也是快速分類或鑑定的方 法之一。微生物農藥登記必須提供其菌種 品系之鑑定資料作為環境與安全評估之用 途,相同菌種生物特性通常較接近,包 括 DNA 也很接近,然而不同「品系」的 微生物可能對其他生物具有極大的致病差 異性,品系間當然也必定在 DNA 上具有 差異。本研究為應用檢驗新技術強化市售 微生物農藥之管理,測試以「逢機擴增多 型性 DNA (random amplified polymorphic DNA, RAPD) 」辨識菌種品系 ( 圖 27) , 當找到合適的引子,進行 DNA 擴增反應 後直接搭配高解析溶解曲線分析 (RAPD- HRM) 或接續進行電泳,特定引子的 RAPD ,可以獲得特異性 DNA 資訊,能 夠用於區分不同菌種品系。
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