藥毒所95年度

32 農業藥物毒物試驗所九十五年度年報 圖 19. 間接型酵素連結免疫吸附反應分析（ ELISA ），測定水體樣本 41 ％ 嘉磷塞之殘留量。 • 假蓬屬雜草抗除草劑特性研究 • 經由嘉磷塞感性（ S ）及抗性（ R ）美洲 假蓬雜草（ Conyza ）之藥劑反應，以乾重為 基礎的 ED 50 R/S ＝ 10-16 。進而完成感及抗 性美洲假蓬 cDNA library 之建構及嘉磷塞 標的 EPSPS 基因核酸序列之篩選與比較， 8 個 EPSPS 基因依相似度分為 3 類別。 3 類 EPSPS 酵素活性分析結果顯示，重組蛋白質 EPSPS1 、 EPSPS2 及 EPSPS3 之 I 50 值分別 為 0.1 、 0.5 及 0.5 kg ai ha -1 ， R/S EPSPS 值 約為 5 倍，顯示 EPSPS 不同 isoform 對嘉 磷 塞 親 和 性 具 差 異 性 ， 以 EPSPS2 及 EPSPS3 對嘉磷塞較具耐受性（圖 20. （ A ））。 利用蛋白質二次電泳及 Western blot 技 術，檢測感及抗性美洲假蓬 EPSPS 蛋白 質，結果顯示於根、莖、葉及花穗皆可表現， EPSPS 蛋白含量及 isoform 以幼葉及根部 較多。感及抗性美洲假蓬經嘉磷塞藥劑 （ 1 kg ha -1 ）處理後，抗性美洲假蓬幼葉及根部 於較高 IP 之 EPSPS isoform 蛋白呈現略 增加現象，高 IP 之 EPSPS 屬於 EPSPS2 isoform 的蛋白（圖 20. （ B ）），顯示於抗性 美洲假蓬經嘉磷塞藥劑處理後，耐受性較高 的 EPSPS isoform 含量較多，此現象可能為 抗性的原因之一。