藥毒所97年度

1 2008 Annual Report 病毒類微生物製劑對大鼠毒性與致病性之安全評估 試驗主要為支援病毒類微生物製劑產 品開發過程中原體之安全評估，以提供生 物性農藥產品商品化所需的毒理資料。以 至少 1x10 8 PIB/ml 之 Spodoptera litura 核 多角體病毒 (nucleopolyhedrovirus, NPV) (Sp l tNPV) 包涵體，進行大鼠口服 (10 ml/kg 體重 ) 與氣管灌注 ( 1 ml/kg 體重 ) 致 病性之安全評估。口服與肺急毒性試驗 以 Spraque-Dawley (SD) 品系大鼠分為 A 、 B 、 C 、 D 、 E 共 5 組，其中 A-C 為處理 組， D 與 E 組為高壓滅菌與空白組，評估 致死率、臨床症狀、組織病變、體增重、 臟器重量、血液學、血液生化、血清蛋白 電泳 ( 圖 13.) 、聚合 鏈鎖反應偵測病毒與 組織病理。結果顯示經 SpltNPV 口服後無 任何大鼠死亡，亦無明顯的臨床症狀，體 重增重、肉眼病變等與對照組比較亦無明 顯差異，臟器重量方面第 21 天處理組大 鼠肝臟顯著低於對照組；大鼠氣管灌注後 肺臟則有明顯之發炎症狀，除第 1 及第 3 天體重顯著低於空白組外，至 21 天時體 重則無明顯差異。血清生化方面尿酸 (Uric acid) 顯著高於空白組處理組與滅菌組肝臟 重量組織顯著低於對照組，肺臟重量則顯 著大於對照組。於口服與氣管灌注試驗血 清蛋白方面，處理組及對照組大鼠皆具相 似之 SDS-PAGE 血清蛋白圖譜與濃度 ( 圖 14.) 。病毒基因增幅則利用 35 與 36 之病 毒引子 (primer) ，增幅核多角體病毒約 680 bp 的多角體蛋白基因片段。經由 (35/36) 引子監測臟器純化之 DNA ，分析結果大鼠 肺臟與其他組織臟器均未增幅出病毒基因 片段。 圖 13. 口服接種 Spodoptera litura 病毒包涵 體後大鼠之血清蛋白 SDS-PAGE 。 Fig 13. SDS-PAGE of serum proteins from rats post oral treatment of Spodoptera litura inclusion body. 圖 14. 氣管接種 Spodoptera litura 病毒包 涵體後大鼠之血清蛋白 SDS-PAGE 圖。 Fig 13. SDS-PAGE of serum proteins from rats post intratracheal administration with Spodoptera litura inclusion body.