藥毒所97年度

28 2008 Annual Report 禾本科雜草抗藥性分子機制探討 完成抗性牛筋草 ACCase CT domain 連接 DIG 為探針，以及 ACCase 多株抗 體之製備。進而運用南方氏及西方氏轉 漬法 (southern blot and Western blot) 分析 抗及感性牛筋草，結果顯示抗及感性牛 筋草 ACCase cDNA 數目及蛋白表現量皆 無明顯差異；北方氏轉漬法 (northern blot) 結果顯示：抗及感性牛筋草 ACCase 皆以 根部表達量最高，其次為初生葉，成熟 葉者最低；施藥後 7 及 10 日，感性牛筋 草 ACCase RNA 表現量有略增加現象， 可能為 ACCase 作用受抑制之後的自身 回饋調節所致，抗及感性牛筋草 ACCase RNA 表達量亦無顯著差異。綜合 96 年度 針對抗及感性牛筋草 ACCase 基因選殖及 序列之結果，推測抗性牛筋草於 ACCase 的 CT domain 第 2078 個胺基酸由 aspartic acid 改變為 glycine 是抗性的主因。再經 由 multiplex PCR 分子鑑定技術，可同步檢 出抗禾本科除草劑及嘉磷塞的牛筋草族群 ( 圖 27.) ，可應用於農地抗藥性生物之監測 及管理。 圖 27. 利用 multiplex PCR 之抗及感性專一性引子檢測牛筋草 15 個族群之電泳圖譜 . 對 ACCase 抑 制劑為抗及感性牛筋草者可分別增幅 636 及 320 bp 核酸片段；對嘉磷塞具有抗及感性牛 筋草者可分別增幅 403 及 222 bp 核酸片段。