臺灣農藥科學第四期電子書

62 臺灣農藥科學 第 4 期 進一步以 F2nR2 區間序列片段於 i Phyclassifier 網站進行限制酵素片段長度 多型性分析，結果可得知來自臺灣、緬 甸、中國、澳洲的豇豆植物菌質體菌系與 感染萊姆的 16SrII-B 亞群菌系的相似係數 為 0.88 ，可歸屬於 16SrII 菌群中的 16SrII- A 亞群 ( 落花生簇葉病菌群 ) ( 圖五 ) ；來 自伊朗的豇豆植物菌質體菌系則與感染車 軸草之菌系歸屬於 16SrVI 之菌群；來自 印度的三個豇豆植物菌質體菌系則分屬於 16SrI 、 16SrII-D 及 16SrXIV-A 之分群。 討論 長豇豆為國人喜愛的豆科蔬菜，主要 以嫩莢供膳食用，為夏季重要的蔬菜之 一。 2015 年於雲林縣水林鄉首次發現長 豇豆花器葉化症，根據當地老農表示該狀 況長年來偶有零散發生，俗稱「瘋欉」， 且懷疑為病毒感染所造成。首先以電子顯 微鏡觀察罹病組織，發現其維管束組織之 篩管內有植物菌質體存在，再進一步以巢 氏聚合酶連鎖反應證實該病症與植物菌質 體有關。親緣關係樹狀圖及限制酵素片段 長度多型性分析其分群，結果顯示臺灣長 豇豆花器葉化症菌系與來自緬甸、中國、 印度及澳洲之菌系皆歸屬於落花生簇葉病 病菌群 (16SrII-A) 。 圖五、 利用 i Phyclassifie 網站針對臺灣長豇豆花器葉化症 ( 左、中 ) 及 16SrII-A 亞群：落 花生簇葉病菌群 ( 右 ) 16SrRNA 之 F2nR2 區域模擬 17 種限制酵素片段長度多型性 分析。 Fig. 5. Virtual RFLP patterns of the F2nR2 region of the 16SrRNA gene from phytoplasma strains KU170532 (left) and KU170533 (center) found on Vigna sesquipedalisa and from the 16SrII-A subgroup phytoplasma strain L33765 (right) of peanut witches’-broom. Patterns were generated by 17 restriction enzymes (AluI, BamHI, BfaI, BstUI, DraI, EcoRI, HaeIII, HhaI, HinfI, HpaI, HpaII, KpnI, Sau3AI, MseI, RsaI, SspI, and TaqI) using the i Phyclassifier program. MW Alu I Bam HI Bf aI Bst UI Dra I Eco RI Hae III Hha I Hinf I Hpa I Hpa II Kpn I Sau 3AI Mse I Rsa I Ssp I Taq I MW MW Alu I Bam HI Bf aI Bst UI Dra I Eco RI Hae III Hha I Hinf I Hpa I Hpa II Kpn I Sau 3AI Mse I Rsa I Ssp I Taq I MW MW Alu I Bam HI Bf aI Bst UI Dra I Eco RI Hae III Hha I Hinf I Hpa I Hpa II Kpn I Sau 3AI Mse I Rsa I Ssp I Taq I MW KU170533 L33765 KU170532