藥毒所98年度

40 微生物殺蟲殺菌基因之選殖及轉殖應用 細菌類生物農藥之研發 利用 PCR 配合專一性引子增幅本 土蘇力菌 ICP 及仙人掌桿菌 VIP 基因， 將基因產物構築定序，核酸序列分析， 並進行基因表現，測試殺蟲效果檢定生 物活性。完成木黴菌幾丁質分解酵素之 選殖，並測試其於 E. coli 之表現。 採集土壤及粉塵樣品，篩選得到 39 株殺蟲結晶蛋白皆呈現典型的雙金 字塔形 (bipyramid) 的蘇力菌 ( Bacillus thuringinesis ) 。利用聚合 連鎖反應 (polymerase chain reaction, PCR) 證實含 防治鱗翅目昆蟲之 cry1 型殺蟲結晶基 因。採集自台北植物園之不同樹種之 葉片樣品，篩選得到 90 株蘇力菌菌株 ( 圖 29.) 。利用 PCR 進行基因型分類 鑑定， 90 株分離株皆含防治鱗翅目昆 蟲之 cry1 型殺蟲結晶基因，其中佔最 多數的 cry1 型基因組合為 1Aa, 1Ab, 1C, 1D, 1F ，共計 18 株佔篩得菌株的 20 ％。本年度自採集之土樣中累計蒐 存螢光假單胞菌 84 株，並利用 PCR 完成重要菌種鑑定，其中 60 株為 P. putida 、 1 株為 P. aeruginosa 、 1 株為 P. fluorescens ，另有 22 株之種名待確認。 完成 18 株本土芽孢桿菌之蒐集與生物 活性測試，篩獲至少 2 株具有開發潛力 之菌株。完成 3 種蟲生病原微生物在室 內的殺蟲效果評估與 2 場田間防治效果 評估 ( 表 13.) 。完成檢測 3 件市售之微 生物殺菌劑─枯草桿菌商品的有效成分 檢測。完成蘇力菌 cry 基因檢測 25 件 與力價檢測 19 件。 圖 29. 葉面採集 Bt 基因型。 九 微生物農藥資源之研發、轉殖與應用