藥毒所104年度

32 壹 貳 參 附 研發增益植物健康之多功能蘇力菌資源 選擇屬於鮎澤蘇力菌 ( Bacillus thuringiensis subsp. aizawai ， Bta ) 及庫斯蘇力 菌 ( Bt subsp. kurstaki ， Btk ) 亞種下，不同品系之五菌株 ( Bta A603 、 Bta Ab12 、 Bta ABTS1857 、 Btk E911 及 Btk ABTS351) ，探討對促進生長、抑制病原菌等殺蟲以外的附 加效果。先以聚合酶連鎖反應 (PCR) 進行基因檢測，供試菌株皆可檢出溶磷 (Phosphate solubilization) 、吲 哚 -3- 乙酸 (Indole-3-acetic acid, IAA) 、嵌鐵物質 (Siderophore) 、 1- 胺基環 丙烷 - 羧酸脫胺酶 (1-aminocyclopropane-1- carboxylate deaminase, ACCD) 、幾丁質分解酶 (Chitinase) 及 β -1,3- 葡萄聚醣水解酶 ( β -1,3-glucanase) 之相關基因。再藉由生化分析， 發現供試蘇力菌菌株均有 IAA 生成、溶磷反應，以及尿素分解酶、幾丁質分解酶及硝酸 還原酶的產生。另與植物病原菌共同對峙培養，也產生拮抗效果，表現抑菌的潛力。而 在高鹽環境下，供試蘇力菌也仍有 IAA 及尿素分解酶的生成，表現耐鹽特性。半田間 試驗結果，蘇力菌確實促進青梗白菜、小白菜 ( 圖 24) 、菸草、四季豆、小黃瓜、茄子等 作物生長；也能協助葉面噴灑及根部施用等肥料利用，以及降低軟腐及黑腐病原菌危害 等效用。田間試驗中，也顯示增加結球甘藍的重量。綜合顯示蘇力菌兼具促生、增進肥 效、抑菌及減緩高鹽逆境等多項特性，可提升作物健康、品質及產量。 DNA 快速萃取試劑萃取甜菜夜蛾核多角體病毒 ( Spodoptera exigua nucleopolyhedro virus, SeNPV) 樣品，及 PCR 增幅產生 200-300 bp 之專一性 DNA 產物核酸定序分析，序列於 NCBI 基因資料庫 BLAST 比對確實為 SeNPV 。 微生物農藥菌種資源檢驗新技術之開發 蘇力菌 cry1 型基因 PCR 鑑定分析 質體圖譜（ plasmid profile ）鑑別分析 殺蟲結晶蛋白之 HPLC 圖譜分析 殺蟲結晶蛋白之（ cry1Ab ）全基因定序 杜邦全自動核酸指紋鑑定系統 脈衝式電泳分析（ PFGE ） 綠木黴菌 ITS 定序 甜菜夜蛾核多角體病毒基因定序 逢機擴增多型性 DNA （ RAPD ） 高解析溶解曲線 （ HRM ）分析 真菌 病毒 枯草或液 化澱粉芽 孢桿菌 圖 23. 開發菌種之檢驗新技術。