藥毒所95年度

31 • 除草劑藥害分子免疫分析技術研發 • 在國內常使用的除草劑嘉磷塞，目前主 要檢測方法大多以 HPLC 為主，但耗時且昂 貴。本實驗主要自備除草劑（ Glyphosate ，嘉 磷塞）半抗原（ Hapten ），利用 glutaraldehyde （ GA ）法螯合，將嘉磷塞與兩種攜帶蛋白載 體分別為：牛血清白蛋白（ BSA ）、 mcKLH 蛋 白 進 行 接 合 ， 形 成 兩 種 接 合 抗 原 glyphosate-BSA 蛋 白 抗 原 及 glyphosate-mcKLH 蛋白抗原，並與兩種對照 組 BSA 蛋白抗原、 mcKLH 蛋白抗原，分 別免疫於紐西蘭大白兔誘發產生多株抗體， 製備成四種多株抗體分別為： BSA 蛋白多株 抗 體 、 mcKLH 蛋 白 多 株 抗 體 、 glyphosate-BSA 蛋白多株抗體及 glyphosate- mcKLH 蛋白多株抗體；利用棋盤方格法以 10 mM 原體嘉磷塞水體接合抗原與抗體，分 別連續稀釋進行 ELISA 特異性與敏感性測 試，結果抗體最佳稀釋倍數 10X- 100X （圖 18. ）。萃取與純化水體樣本 41 ％ 嘉磷塞， 以 間 接 型 酵 素 連 結 免 疫 吸 附 反 應 分 析 （ ELISA ）測定水體樣本 41 ％ 嘉磷塞之殘 留 量 ， 可 偵 測 嘉 磷 塞 濃 度 線 性 範 圍 60 ppm-1,000 ppm ，最低偵測濃度為 50 ppm （圖 19. ）。 圖 18. BSA 蛋白多株抗體、 glyphosate-BSA 蛋白多株抗體、 SPF 抗體及 10mM 嘉磷塞結合抗原，連續稀釋之 ELISA 特異性及敏感度測試。 （ A ）多株抗體稀釋 10X ；（ B ）多株抗體稀釋 50X ；（ C ）多株抗體稀釋 100X ；（ D ）多株抗體稀釋 200X 。