藥毒所109年度

試驗研究 35 壹 荔枝椿象病原真菌分離鑑定及應用評估 荔枝椿象為國內近幾年之新興害 蟲，近年來嚴重危害無患子科果樹或行 道樹的重要入侵害蟲，本研究於霧峰桐 林、象鼻山及彰化員林、芬園、社頭等 地區分離本土荔枝椿象病原真菌，並 完成其病原性確認，挑選 5 種蟲生真 菌 (SF002 、 WFT1-2 、 SF001 、 WFT1- 1 及 A1) 基因組 DNA ，分別以 ITS 、 β -tubulin 及 elongation factor 1 α 引子對進 行聚合酶連鎖反應增幅基因產物進行定 序並進行 BLASTn 序列比對，鑑定結果 屬於 Purpureocillium takamizusanense ， 另挑選 5 種蟲生真菌 (SF002 、 WFT1- 2 、 SF001 、 WFT1-1 及 A1) 基因組 DNA 進行 RAPD-PCR 及 HRM ， RAPD 電泳 圖譜及 HRM 波形結果顯示， SF002 、 WFT1-2 、 SF001 、 WFT1-1 具有相同的 波形圖譜與電泳圖譜，對照菌種 A1 具有 別於 SF002 、 WFT1-2 、 SF001 、 WFT1- 1 之波形圖譜與電泳圖譜 ( 圖 21) 。綜合 圖 21. 5 種蟲生真菌 ( 防治荔枝椿象 ) 之 RAPD-HRM curve 及 RAPD-PCR 電泳圖譜 Lane1~4, 6 ： SF002- 1 、 SF002-2 、 WFT1-2 、 SF001 、 WFT1-1 ( Purpureocillium takamizusanense ), Lane 5 ： A1( Beauveria bassiana ) 。 表 17. 天然素材配方 1 、 4 水中釋放量 ( μ g/g) 及累積釋放率 (%) 項目 時間 ( 時 ) 0 2 4 6 24 48 72 釋放量 ( μ g/g) 配方 1 97.67 ± 6.75 189.51 ± 13.02 167.43 ± 9.28 130.21 ± 12.57 144.77 ± 8.47 109.26 ± 6.81 100.70 ± 9.57 配方 4 130.51 ± 37.40 368.56 ± 36.14 327.98 ± 9.94 215.81 ± 12.26 197.23 ± 19.29 144.48 ± 15.04 136.55 ± 8.24 累積 釋放率 (%) 配方 1 5.7 16.8 26.6 34.2 42.7 49.1 55.0 配方 4 4.9 18.8 31.1 39.2 46.6 52.1 57.2 ԗғсɜɿӝ0՝ʿ ד ǃŭ0Ҍׅ^ͅșͨǃķ ד գʚ0ij ד œոыɧ SF001-TP-P2 SF002-TP-P2 WFT1-1-P1 ÒƇö͡ʡыœոыɧ A1 ūсɜɿ ӝǍҌ0 14 ĸСʞ̮œ¡̉ 35.00±11.78% 43.33±13.33% 43.33±16.67% Ò 62.22±1.92% ד K#ǻa՜ȩ¢ͅƳ̢̓՝ʿсɜɿӝ0ĝ΄ͽΠӤȣ ד KɏЏ Njͅȩсɜɿӝ0՝ʿ# Ď 21. 5 ΘҌ̓ʹы ( ՝ʿсɜɿӝ ) 0 RAPD-HRM curve Ò RAPD-PCR վ ˉĎӒ Lane1~4, 6 ז SF002-1 SF002-2 WFT1-2 SF001 WFT1-1 ( Purpureocillium takamizusanense ), Lane5 ז A1( Beauveria bassiana )