藥毒所110年度

2021 Annual Report 34 畫擬健全養蟲設施管理及供試昆蟲品質提 升，不管是作為新藥劑 ( 包含生物農藥及 化學藥劑 ) 開發之生物檢定，或是性費洛 蒙之研發都有其必要性。已完成養蟲室小 菜蛾、甜菜夜蛾、斜紋夜蛾、擬尺蠖、玉 米穗蟲、大蠟蛾及蒼蠅 7 種蟲源之飼育標 準流程初稿，並完成現有四種供試害蟲之 生活史，今年供試害蟲之收入為 263,000 元，除此之外，近期養蟲室發現甜菜夜蛾 受微孢子蟲 (nosema) 汙染，影響供試昆 蟲品質，雖有以顯微鏡檢定法定期鏡檢， 但鏡檢需要汙染數量較大時才容易發現， 因此建立 nosema 分子檢驗技術，希望能 提早發現汙染情形，以提升供試害蟲之品 質。 建立蘇力菌貝他外毒素之多種生物及化學檢測方法 為防止含外毒素蘇力菌被製造或 進口，因此針對 β-exotoxin 建立發酵 產物對鱗翅目 (Lepidopteran) 、鞘翅目 (Coleopteran) 、雙翅目 (Dipteran) 、葉蟎 (mites) 、線蟲 (Nematode) 之生物檢測方 法 (bioassay) ，和外毒素基因 PCR 檢測 法。階段完成引進花豆葉飼育二點葉蟎 ( Tetranichus urticae ) 方法、空心菜栽培飼 育南方根瘤線蟲 ( Meloidogyne incognita ) 方法及飼料麥片飼育煙甲蟲 ( Lasioderma serricorne ) 方法並於本實驗維持蟲源。完 成產內或外毒素蘇力菌以 CYS 及 SMB 培 養基製備供試樣品。完成 PCR 檢測產外 毒素相關基因，證實內毒素菌株不帶 cry 1B 基因 830 bp 片段，但產外毒素菌株必 帶有 cry 1B 基因、但不一定帶有 thu 核酸 片段。此法可利用為先期判定否為外毒 素菌株之用。建立以含水介質支撐草莓 葉，利用噴藥塔處理二點葉蟎之技術，顯 示 SMB 培養外毒素菌株之外泌產物可殺 死葉蟎，其致死速度不如化學藥劑快，但 至終致死效果不亞於化學藥劑。但內毒 素菌株則無外毒素產生，無殺蟎效果。 SMB 培養基培養的外毒素產物會抑制煙 甲蟲的成長發育。尤其是帶有 thuE 核酸 片段的外毒素菌株，它也可以造成南方根 瘤線蟲幼蟲麻痺和影響根廇數，以及卵 塊數的產生，減少根部受害。搭配家蠅 ( Musca domestica ) 生物活性測試，顯示 CYS 培養內、外毒素菌株之產物不會影 響家蠅的成長。 SMB 培養外毒素菌株之 外泌產物致使家蠅無法正常成長，但內毒 素菌株則無否。而顯示 CYS 培養內毒素 菌株之內生產物有效殺死小菜蛾 ( Plutella xylostella ) ，但外毒素菌株則否。本研究 報導蘇力菌菌株之基因鑑定技術，並且建 立簡易的生物活性測試法，再次證實帶外 毒素基因之蘇力菌菌株，在特定培養基和 培養條件下，會產生外毒素，對鞘翅目、 雙翅目、蟎類、線蟲等各類生物具生物活 性 ( 圖 25) 。