藥毒所97年度

2008 Annual Report 表 6. 處理農藥其他成分對大鼠 9.5 天胚胎發育影響 Table 6. Effect of treatment with pesticide inert on developmental of rat embryo culture of day 9.5 for 48 hours. Treatment (M) Crown-rump length Head length Developmental score Unt - ± ± DMSO - ± ± AF - ± ± BG - ± ± JC - ± ± JGB - ± ± MGOS - ± ± MB - ± ± NYS - ± ± NBA - ± ± PB83 - ± ± PBCS - ± ± RhB - ± ± Rh6G - ± ± MBC + + + BEN + + + Note: 1. All chemical concentrate are 3.875E-6, 7.75E-6, 1.55E-5, 3.1E-5, 6.2E-5, and 1.2E-4 M 2. -: no effect; ± : little effect; +: effect; ++: potential effect 3.Unt: untreat; AF: acid fuchsin; BG: brilliant green; IC: indigo armine; JGB: janus green B; MGOS: malachite green oxalate salt; MB:methyl blue; NYS: naphthol yellow S; NBA: nile blue A; PB 83: page blue 83; PBCS: patent blue caccium salt; Rh B: rhodamine B; Rh 6G: rohdamine 6G; MBC: carbendazim; BEN: benomyl. 人體荷爾蒙受體反應基因與螢光報導基因之建構選殖 本計畫乃建立人體細胞內雌激素受 體反應基因 (estrogen responsive elements, EREs) 與綠螢光蛋白 (green fluorescence protein, GFP) 報導基因之檢測系統，以供 快速篩檢環境荷爾蒙作為評估農藥安全 性的參考。利用 TR-PCR 技術倍增 ERE 的 DNA 片段，接到 pGEM-T 後轉送至 E. coli ，得到含 3~7 重複 ERE 的四株 pGEM- 3,4,6.5,7ERE/ E. coli 菌株。接著以 Eco R I/ Bam H I 限制 切下 3~7 個 ERE 片段 後，接合到 pEGFP-1 之 Eco R I/ Bam H I 切位上並轉送至 E. coli 內抽取其質體， 得到 pEGFP-3,4,6.5,7ERE 四株帶有綠螢 光蛋白報導基因之重組質體。另以 PCR 反應增幅 TK promoter 片段後，嵌入到 pEGFP-3,4,6.5,7ERE 四株質體之 Bam H 18