農藥所112年度

架構大鼠生殖毒性半體外篩選模式 本研究四年來完成免賴得 (benomyl) 、貝芬替 (carbendazim) 、平克座 (penconazole) 、普克利 (propiconazole) 、得克利 (tebuconazole) 、三泰芬 (triadimefon) 、氟他胺 (flutamide) ( 雄性素受體拮抗劑 ) 、菲克利 (hexaconazole) 、 待克利 (difenoconazole) 、賽滅寧 (cypermethrin) 、百滅寧 (permethrin) 、第滅寧 (deltamethrin) 、嘉磷塞 (glyphosate) 、腐絶 (thiabendazole) 、滅達樂 (metalaxyl) 及 四氯異苯腈 (chlorothalonil) 等 15 種農藥及雄性素受體拮抗劑在大鼠 9.5/ 10.5 天 胚胎影響測試。結果在外觀檢查，正對照免賴得與貝芬替誘發大鼠胚胎腦部與尾 神經管異常，其他農藥則大致僅尾部異常，大多屬正常範圍內，此結果顯示，大 鼠胚胎評估方法就出生前發育毒性替代性而言，具替代性功能。測試胚胎分別保 存在 10% 中性福馬林與 PBS 中分別供免疫染色分析荷爾蒙受體活性與 WB 方 法進行蛋白分析，重複進行雄性素受體 (androgen receptor, AR) 、雌性素受體 (estrogen receptor, ERα 與 ERβ) 、甲狀腺素受體 (thyroid receptor, TRα 與 TRβ) 及 環化酶 (aromatase) 之免疫染色分析與西方墨點蛋白表現分析。結果顯示，在免 疫染色分析，免賴得、貝芬替、 平克座、三泰芬及普克利具雄性素受體促進反 應 (androgen receptor agonist) ；平克座與三泰芬具雌性素受體 (α 與 β) 促進反應， 普克利則對雌性素受體 (α) 促進反應；平克座與三泰芬及普克利則對甲狀腺素 受體 (β) 促進反應。在蛋白表現分析，免賴得、貝芬替 ( 圖 17 ) 、普克利 ( 圖 18) 、 得克利 ( 圖 18 ) 、平克座及三泰芬等對雄性素受體促進表現。得克利增加雌性素 受體 α (long isofrom 與 short isoform) 表現；普克利、賽滅寧及嘉磷塞對雌性素 受體 α (long isofrom) 表現不明顯；賽滅寧也增加雌性素受體 α (short isoform) ； 嘉磷塞則降低雌性素受體 α (short isoform) ，普克利則輕微表現雌性素受體 α (short isoform) 。普克利、得克利及賽滅寧均增加雌性素受體 β ；而嘉磷塞則降低。免賴 得、貝芬替、普克利、得克利、平克座及三泰芬等抑制甲狀腺受體 α 表現而賽滅 寧及嘉磷塞則表現不明顯；貝芬替、平克座及三泰芬輕微抑制甲狀腺受體 α 表 現，賽滅寧增加甲狀腺受體 β 表現而嘉磷塞則輕微表現。免賴得、貝芬替、普克 利 ( 圖 19 ) 、得克利 ( 圖 19 ) 、平克座 ( 圖 20 ) 、三泰芬 ( 圖 20 ) 、賽滅寧及嘉磷塞 等對均增加環化酶表現。為驗證胚胎培養推估農藥誘發生殖毒性與內分泌干擾作 用準確性，以貝芬替進行大鼠多代生殖毒性試驗結果顯示，貝分替誘發癲癇之發 育神中經毒性。依據大鼠 9.5 天胚胎培養後免疫染色分析與蛋白表現分析結果，