藥毒所110年度

2021 Annual Report 28 建立大鼠出生前發育毒性半體外替代試驗模式 本研究完成免賴得 (benomyl ) ( 正 對照 ) 、貝芬替 ( c a r b e nd a z im) ( 正對 照 ) 、平克座 (penconazo l e ) 、普克利 (propiconazole) 、得克利 (tebuconazole) 、 三泰芬 (triadimefon) 、氟他胺 (flutamide) ( 負對照 ) 、菲克利 (hexaconazole) 、待克利 (difenoconazole) 、賽滅寧 (cypermethrin) 、 百 滅 寧 ( p e r m e t h r i n ) 、 第 滅 寧 (deltamethrin) 、嘉磷塞 (glyphosate) 、 腐絕 (thiabendazole) ( 負對照 ) 、滅達樂 (metalaxyl) 及四氯異苯腈 (chlorothalonil) 等 16 種農藥或負對照藥劑在大鼠 10.5 天 胚胎影響測試 ( 表 7) 。結果在外觀檢查， 正對照免賴得與貝芬替誘發大鼠胚胎腦 部與尾神經管異常，其他農藥則大致僅 尾部輕微異常，大多屬正常範圍內，此 結果顯示，大鼠胚胎評估方法就出生前 發育毒性替代性而言，具替代性功能。 測試胚胎分別保存在 10% 中性福馬林 與 PBS 中分別供免疫染色分析荷爾蒙 受體活性與 WB 方法進行蛋白分析，以 建立半體外培養評估大鼠出生前發育毒 性。進行雄性素受體 (androgen receptor, AR) 、雌性素受體 (estrogen receptor, ER α 與 ER β) 、甲狀腺素受體 (TR α 與 TR β) 及環化酶 (aromatase) 之免疫染色分析 與西方墨點蛋白表現分析。結果顯示， 在免疫染色分析，免賴得 (benomyl) 、 貝芬替 (carbendazim) 具雄性素受體促進 反應 (androgen receptor agonist) ；平克座 (penconazole) 與三泰芬 (triadimefon) 具雌 性素受體 (estrogen receptor α 與 β) 促進 反應，普克利 (propiconazole) 則對雌性素 受體 (estrogen receptor α) 促進反應；平克 座 (penconazole) 與三泰芬 (triadimefon) 及 普克利 (propiconazole) 則對甲狀腺素受體 (thyroid receptor β) 促進反應。在蛋白表現 分析，免賴得、貝芬替、氟他胺及三泰芬 等對雄性素受體表現不明顯；得克利與普 克利則有輕微表現。得克利增加雌性素受 體 α (long isofrom 與 short isoform) 表現； 普克利、賽滅寧及嘉磷塞對雌性素受體 α (long isofrom) 表現不明顯；賽滅寧也增加 雌性素受體 α (short isoform) ；嘉磷塞則降 低雌性素受體 α (short isoform) ，普克利則 輕微表現雌性素受體 α (short isoform) 。普 克利、得克利及賽滅寧均增加雌性素受體 β 表現；而嘉磷塞則降低。貝芬替、得克 利促甲狀腺受體 α 表現而普克利、賽滅寧 及嘉磷塞則表現不明顯；得克利與賽滅寧 增加甲狀腺受體 β 表現而普克利與嘉磷塞 則輕微表現。普克利與得克利及賽滅寧及 嘉磷塞均增加環化酶表現。試驗結果可推 估 (1) OECD 422 結合重複劑量毒性研究 與生殖／發育毒性篩選試驗：該研究將提 供與重複劑量相關的生殖／發育毒性的評 估； (2) OECD 421 生殖／發育毒性篩選 試驗：這項研究將評估與重複給藥有關的 生殖／發育毒性； (3) OECD 414 出生前 發育毒性研究：提供有關懷孕期間反復口 服某種物質的影響的信息。研究結果應與 亞慢性、生殖、毒代動力學和其他研究的 發現結合起來解釋。