臺灣農藥科學第四期電子書

72 臺灣農藥科學 第 4 期 蔗糖 BK 培養基中，均勻震盪後，置於 37 ℃恆溫箱中 30 min 後，取上清液於 485 nm 波長下量測吸光值 (A 425 ) 。另將沉澱 物置於 55 ℃烘箱中，經 12 h 後秤取乾 重，作為花粉活性估算用。 相對花粉活性 (%) = (A 485( 處理組 ) / 乾重 ( 處理組 ; g) / (A 485( 對照組 ) / 乾重 ( 對照組 ; g) ) × 100% 五、殺菌劑對花粉活力影響 將測試藥劑菲克利之純品及成品分別 配置成 0~50 ppm 系列不同濃度之藥液， 與含有花粉粒細胞之培養液以等體積均勻 混合後，取 100 μL 滴於載玻片凹穴上， 蓋上蓋玻片，放置於舖有濕潤濾紙之培養 皿內，並於 25 ℃ 恆溫箱中 4 h ，取出調查 花粉萌發率及花粉管長度。另依 TTC 染 色法操作步驟進行吸光值量測，分析殺菌 劑處理對花粉活力之影響。 六、統計分析 本試驗採完全逢機設計，各處理皆為 三重複。處理時將同一朵花之花粉粒平均 分配至處理組及對照組，每一重複則為兩 次抽樣選出之花粉粒作為調查樣品。各項 調查資料需計算各處理值之標準機差 (SE) 及進行變方分析，調查資料以平均 值及標準機差 (Mean ± SE) 表示，若有 顯著差異，須進行 Fisher's protected LSD test 表示處理間差異。 結果與討論 一、胡瓜離體花粉活力檢測條件 建立 ( 一 ) 花粉粒數對花粉萌發影響 花粉管萌發率與花粉管伸長長度測量 為評估花粉活力指標之一，前者以花粉管 長度超過花粉粒直徑作為萌發標準，後者 則以測量從花粉粒到花粉管伸長之頂端距 離。兩者調查方式均需以花粉管長度作為 研判依據，故花粉粒間需有適當距離以配 合花粉管之自然伸長，避免因聚集未均勻 分散，而影響花粉之萌發。 李等指出以培養基進行花粉離體培養 作為花粉活力評估之測試體系，須先建立 適宜花粉萌發之培養基濃度及溫度等條 件，以及可精準量測萌發結果之培養時間 長短 (2,3) 。一般隨著培養時間的加長，胡瓜 花粉管發生交錯纏繞之比例會逐漸提高 (3) ， 進而影響萌發率及花粉管長度調查之準確 度。故本研究分別將 100±50 、 300±50 、 500±50 粒之胡瓜花粉粒，以 100 µL 體積 之培養液稀釋後，均勻分散在凹穴載玻片 上，於一小時後觀察花粉管伸長情形 ( 表 一及圖一 ) ，作為花粉粒測試最適粒數決 定之依據。各處理之花粉粒約於兩分鐘後 開始萌發，花粉管向花粉粒外延伸出去。 其中每凹穴 100±50 粒花粉粒處理中，花 粉萌發率為 90.7% ，花粉管伸長長度為 639.7 μm ，比起於每凹穴 300±50 粒之花粉 萌發率 78.0% 及花粉管長度 214.1 μm 處