藥毒所100年度
31 壹 ◆ 試驗 圖 18. 人參、當歸及甘草 5.8S rRNA-ITS 序列增幅之電泳圖譜。( A ) 人參 6 樣品、( B ) 當歸 5 樣品、( C ) 甘草 8 樣品。 中藥草及其加工品有效成分檢測技術之研發 本研究完成人參、當歸及甘草等三 種中藥材中有效成分之快速萃取及儀器 分析方法之開發,利用甲醇及超音波萃 取,離心淨化後之樣品經由高效液相層 析儀搭配紫外光檢測器 ( HPLC-UV ) 分析,找出各藥材最適用之檢測波長及 移動相,分別可自人參、當歸及甘草分 離出 1-3 種指標成分 ( 人參為人參皂 苷 Rb1 、人參皂 苷 Re 及人參皂 苷 Rg1 ,當 歸為阿魏酸,甘草為甘草酸及甘草 苷 )。 以此分析方法實際檢測市售三種中藥材 樣品 20 件,均可測得指標成份存在,其 含量介於 0.02-2.97% 之間,人參藥材中 人參皂 苷 Rb1 之含量最高可達 1.71% , 當歸之阿魏酸含量介於 0.02-0.09% ,甘草 則以甘草酸含量較甘草 苷 為高,最高可 達 2.97% 。核酸標誌已被應用於中草藥的 基原鑑定,其中以 5.8S rRNA-ITS 序列之 比對較常用,主要利用 ITS1 及 ITS2 序列 之共演化特性及同質性 ( identity ), 呈現親緣距離。經由總基因組核酸為模 版,設計高等植物專一性引子,增幅人 參、當歸及甘草等 3 種市售藥材, 5.8S rRNA-ITS 序列長度分別為 615, 600 及 615 bp 。以 NCBI 基因庫之比對,人參及 當歸同種檢體間只有 1-2 個鹼基之差異, 甘草檢體間有 2-5 個鹼基之差異 ( 圖 18 )。
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