藥毒所99年報

46 細菌類生物農藥之研發 圖 36. 利用限制 剪切確認本土光桿菌 0805-P5G 重組質體 (pET29b- prt A) 之 prt A 基因， Lane M: (1kb DNA Ladder) 。 (1) 本土蘇力菌之蒐集與鑑定 以臺灣西部沿海，包括新竹、 臺中、彰化、雲林、嘉義、臺南、高 雄、屏東、恒春及蘭嶼、金門離島， 共 11 地區 85 採樣點，自潮間帶、臨 海珊瑚礁植物帶、砂灘及草本植物 帶、臨海灌木植物帶、海岸林、鹽田 等，六種環境棲地，採取土壤樣本， 進行蘇力菌菌株之分離及殺蟲結晶毒 蛋白基因 ( cry - type gene) 之鑑定。調 查結果顯示共有 4 地區之 10 個採樣 點，篩獲具結晶之蘇力菌 ( 圖 37.) 。 各採樣點平均篩獲結晶蘇力菌之菌株 數量，以金門 (7.2 個 ) 最多，其次為 新竹 (3.3 個 ) 、臺東蘭嶼 (2.6 個 ) ， 再次是恒春半島 (0.5 個 ) 。而各地區 之採樣點平均篩獲結晶蘇力菌的篩 獲機率，分別為臺東蘭嶼 (0.22) 、金 門 (0.33) 、新竹 (0.33) 、屏東恒春半 島 (0.11) 。鑑定所篩獲之蘇力菌菌株 之 cry - 型基因組成，分別有 ND ( 不 含 cry 基因 ) 、 ( 1Aa , 1Ac ) 、 (1Aa , 1C, 1D ) 、 ( 1Aa , 1Ab , 1Ac ) 、 ( 1Aa , 1Ab , 1C , 1D ) 、 ( 1Ab , 1Ac , 1D , 1E ) 等六型。 有篩獲蘇力菌菌株之四地區，其菌株 cry 基因組成，以金門最多型，其次 屬離子的影響， 1 mM 之 ZnSO4 及 ZnCl2 對失活的 PrtA 能恢復 50% 的 相對活性，生物檢定結果顯示，轉殖 株純化之 PrtA 蛋白 經注射後對七齡 大蠟蛾具有殺蟲力， LC50 為 32.70 μ g/mL ，但對餵食三齡美國及本土小 菜蛾致死率卻相當的低。