藥毒所99年報

2010 Annual Report 73 壹 ． 試驗研究 圖 60. 99 年 02 月 24 日 ( 採收後 ) 農試所馬鈴薯田種植基改馬鈴薯表土土壤 (0-20 cm) 中 kan r 菌 (K2231~K2240) 之 nptII 基因分析。 721 bp ： nptII 基因； 989bp ： Tn 5 基因； 194 bp ： 16S rDNA ，內控基因。 P ：正控 Acinetobacter sp. , BD413pFG4 ； N ：負控， Acinetobacter sp.(BCRC 15638) ； B ：空白分析組。 Marker ： GeneRuler TM 100 DNA Ladder 。 K2231 及 2236 出現 npt II 基因 (721 bp) ，但無 Tn 5 基因 (989 bp) 。 989bp M K2231 P N B M K2232 K2233 K2234 K2235 K2236 K2237 K2238 K2239 K2240 194bp 721bp 基改植物對環境生態之影響調查技術之研究 (1) 種植基因改造馬鈴薯田三個時期種植 前、種植中及採收後之土壤樣品中皆 無檢測出 nptII 基因 (721 bp) 。三個時 期共篩選了 300 株 kan r 菌，其中有 22 株含 nptII 基因 (7.3%) ，但均不含 Tn5 基因 (989 bp) ( 圖 60.) 。 種植前、種 植中及採收後之土壤中一般細菌中 kan r 菌 比 例 0.9~1.5% ， 2.4~15.8% ， 0.8~1.9% 。 (2) 99 年 1 ∼ 11 月至農試所隔離試驗田 排放水共收集 12 個水樣， 12 個水 樣皆無基改馬鈴薯 (180 bp) 及基改 水稻轉基因片段 (280 bp) ，其中有 4 個樣品含有基改木瓜 (398 bp) 之片 段 ( 圖 61. 上 ) ，但皆低於同步定量 PCR 偵測極限 (0.24 ng/mL 灌溉水 ) ( 圖 61. 下 ) 。收集 99 年 3 月、 6 月 及 11 月之農試所隔離試驗田排放水 及灌溉水並分析微生物相分布。以 TESS Buffer 法萃取灌溉水及排放水中 DNA ，再以 DGGE 分析，結果顯示微 生物相依季節而異，相同季節採樣之 細菌彼此成一族群。 (3) 收集種植前，種植中，及採收後 1 個 月三時期種植基因轉殖馬鈴薯田土壤 與非基因轉殖馬鈴薯土壤，分析土壤 樣品之磷酸 (Acid phosphatase) 及 去氫 (Dehydrogenase) 之活性測試。 土壤磷酸 活性分別介於 1320~1380 μ g ； 960~1060 μ g ； 400~520 μ g p-nitrophenol/g soil ( 圖 62.) 。去氫 活性分別介於 20~27 μ g ； 11~22 μ g ； 13~37 μ g TPF/g soil( 圖 63.) 。 結 果 顯示土壤酵素活性變化與種植基因轉