藥毒所93年度

45 • 開發線蟲共生細菌光桿菌作為微生物製劑之探討 • 光桿菌之蛋白質製備：完成光桿菌代謝產 物分子量大於 100 kDa 蛋白質的製備，及 DEAE 陰離子交換樹脂層析管柱進行有效成 份的部分純化分析，正進行膠體過濾層析（ gel filtration ）純化分析。 抑制真菌活性測試：試驗結果顯示，除了 對百合白絹病菌沒有明顯抑制效果外，對於其 他 9 種植物病原真菌都有明顯抑制效果，尤其 對於玫瑰灰黴病菌、檬果炭疽病菌、蘋果褐斑 病菌與甜椒疫病菌，具有顯著抑菌效果 ( 圖 18.) 。 抑制細菌活性測試：進行常見細菌與植物 病原細菌的室內抑制細菌譜試驗。試驗結果顯 示，對於蘇力菌、枯草桿菌、仙人掌桿菌、沙 門氏菌、黑腐病原細菌、大腸桿菌、胡蘿蔔軟 腐桿菌與菊花軟腐桿菌等 8 種細菌，全部都有 明顯抑菌效果。 供試昆蟲生物檢定：由試驗結果得知分子 量大於 100 kDa 的毒蛋白複合體，對於小菜蛾 與大蠟蛾的半致死濃度分別為 56 ppm 與 200 ppm ，顯示其具有顯著殺蟲效果，甚至不亞於 市售蘇力菌商品。雖然濃度為 800 ppm 時對於 玉米穗蟲、斜紋夜蛾、擬尺蠖與甜菜夜蛾並沒 有致死效果，但卻有抑制玉米穗蟲取食的效 應，玉米穗蟲的蟲體可隨中毒程度升高而減少 取食，在應用上仍具有降低蟲害的部份效果。 菌株蒐集鑑定：利用大蠟蛾誘餌法，採集 蟲生病原線蟲。線蟲種類經電子顯微鏡觀察， 證實首度篩獲台灣本土的異小桿線蟲。配合線 蟲共生細菌形態、生化試驗、 16 S rRNA 等方 法，已建立菌株鑑定方法與流程。目前共有 15 株共生細菌被分離出來，其中 2 株本土光 桿菌菌株已完成確認試驗。 圖 18. 光桿菌發酵液防治檬果炭疽病的效果。 Fig. 18. The disease incidence of Mango anthracnose was decreased by the treatment of Photorhabdus luminescens ATCC 29999. • 昆蟲病毒殺蟲劑開發 • 已構築完成 vAc/Pag90-IT2(contain leader peptide) 及 vAc /pHsp70–EGFP/Pag 90-LqhIT2 (contain leader peptide) 等 6 個重組病毒。經生物 檢定結果顯示，重組病毒 vAc/Pag90-IT2 (contain leader peptide) 較野生型加州苜蓿夜蛾病毒有明 顯的殺蟲效率。以 1 × 10 6 PIBs/ml 濃度處理 2 齡