農藥所113年度

13 建構高通量非基因毒性致癌物細胞轉化檢測體系 本研究參考 OECD Guidance Document 231 (2017) 採用 Bhas 42 細胞株，搭 配多孔盤自動化高內涵影像分析系統，降低人為判定偏差及判讀時間，建構出高 通量細胞轉化檢測體系應用於致癌性綜合測試與評估方法分析 (IATA) ；另搭配 次世代定序技術及轉錄組分析，找出已知致癌物引發細胞轉化之可能指標基因及 蛋白，作為機制分析標的。 113 年完成改良細胞轉化試驗之收樣前處理流程及染 色方法，經高內涵影像分析系統進行人工判讀及自動判讀比對， Cohen’s kappa 分 析結果高達 0.839 ，顯示研究人員及自動判讀結果一致性高，自動判讀時間可減 少 70% ，對正反應對照物亦保有高敏感性，可減省人力、降低人為偏差。另用已 知腫瘤促進化合物或農藥進行細胞轉化試驗，進行次世代定序以並 Venn diagram 分析，發現有 5 項重疊之致癌相關上調基因，並以即時聚合酶連鎖反應確認至少 有 3 項上調基因，具致癌性生物指標潛力，可增加致癌性相關機制之瞭解。 圖 15 、改良細胞轉化試驗收樣前處理及染色方法，再經高內涵影像分析系統進 行自動判讀。 精進化學品急毒性試驗之疼痛評估及實驗動物照護改善策略 OECD 試驗指引中要求應透過試驗前綜合性測試與評估策略 (Integrated Approaches to Testing and Assessment, IATA) ，不得已才進行動物試驗。我國法規 擬採雙軌制接受動物或體外試驗。鑒於長久採動物且不像歐盟強制先體外試驗無 法分級才進行動物試驗，因此 IATA 於我國更重要。本研究以實際案例進行 IATA 及完整疼痛評估瞭解試驗對動物的影響，且執行體外試驗及試驗選用的損害利益 評估 (harm-benefit analysis, HBA) 。