藥毒所97年度

2008 Annual Report 圖 32. 蘇力菌 Bt. cry － B 轉殖株 (TBt. cry － B) 、穿梭載體轉殖株 (p α Bt. cry － B) 與 Bt. cry － B 宿主 (Bt. cry － B host) 無菌體發酵液之幾丁質分解酵素活性測定。使用 CM-chitin-RBV 法測定，共測七天。 Ligation cry1Ab 3.7kb 1A29A 1Ab37B1 cry1Ab full length PCR product pSMART-cry1Ab 5.5 kb cry1Ab 3.7kb Kan 圖 31. 以專一性引子增幅 cry1 Ab 並構築至中間載體。 利用桿狀病毒為載體以擬尺蠖幼蟲為生物反應器生產豬熱緊迫蛋白 實驗結果顯示 vAcP10Hsp70 重組病毒 感染 Sf21 昆蟲細胞所表現的 Hsp70 蛋白 質具有生理活性。為了以擬尺蠖幼蟲作為 生物反應器生產 Hsp70 豬熱緊迫蛋白，因 此將 vAcP10Hsp70 重組病毒感染四齡初擬 尺蠖幼蟲後，經 SDS-PAGE 膠體分析及西 方點墨法可偵測到 Hsp70 蛋白質的表現。 經純化後，結果顯示擬尺蠖幼蟲生產的 Hsp70 蛋白質具有抗熱的生理活性。 開發含免疫調節蛋白之重組桿狀病毒 病毒 vAcP10Fve 感染 Sf21 昆蟲細胞 後，以西方點墨法可偵測該 Fve 蛋白質 的表現。該重組病毒 vAcP10Fve 以飼料 表面污染法測試對三齡擬尺蠖幼蟲的致 病力，結果在 5x10 5 PIBs /ml 的劑量下， vAcP10Fve 和野生型 AcMNPV 的 LC 50 分 別為 5.3 ± 1.2x10 5 PIBs/ml 及 1.8 ± 2.3x10 7 PIBs /ml ， LT 50 縮短為 139.2 小時。