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三種農藥之多重混合毒性
5
染色病理評估：所有大鼠解剖時將
5
葉肝
葉均先取各
1/3
置於夾鍊袋中，並迅速丟入
液態氮中固定，並置於
-80
°
C
冰櫃中儲存並
進行冷凍切片製成
5
μ
m
厚度之冷凍組織切
片， 以
L-glutamic acid (Sigma-Aldrich, Mis-
souri, USA)
試藥處理後經
gamma GT
染色
法
(10)
及經油紅染色法後，分別於光學顯微
鏡下進行
gamma GT
陽性病灶與脂肪肝病
理評估。
八、血清中乙醯膽鹼酯酶分析：以商
品化乙醯膽鹼酯酶酵素套組
(Sunlongbiotech,
Zhejiang, China)
測試並以
Epoch
®
免疫酵素
分析儀
(Bioteck, Beirut, Lebanon)
於
450 nm
波長下分析定量血清中乙醯膽鹼酯酶含量。
九、 肝 臟
CYP1A1 & 1A2
、
CYP3A4
、
CYP2B6
、
CYP2C19
等蛋白質西方墨點法
(western blot analysis)
分析評估：肝臟組織
進行肝細胞中蛋白質萃取，經蛋白質定量
後進行蛋白質電泳並轉漬至
polyvinylidene
difluoride (PVDF)
膜上並分別以特異性
之
CYP1A1 & 1A2
、
CYP3A4
、
CYP2B6
及
CYP2C19 (Abcam, Cambridge, USA)
等單株
抗體標示
CYP
等蛋白。
十、結果統計分析：各組數據以平均值
及標準偏差值
(Mean
±
SD)
表示，並以
One-
Way Analysis of Variance (STATISTICA, Tulsa,
USA)
之
LSD
分析法，進行處理與對照組間
統計分析，
P
值小於
0.05
為具統計顯著性
差異。
十一、相關組織之病變程度
(criterion)
乃依據組織病變程度量化判讀品質標準判
讀
(11)
，標準如下：
(1)
程度無，積分
(score)
為
0
：無可見之組織病理變化
(no significant
lesion)
。
(2)
程度為極少
(minimal)
，積分
為
1
：具
< 1%
以下程度的組織病理變化。
(3)
程度為輕微
(slightly)
，積分為
2
：具
1 ~
25%
程度的組織病理變化。
(4)
程度為中
度
(moderate)
，積分為
3
：具
26 ~ 50%
程
度的組織病理變化。
(5)
程度為中度至嚴
重
(moderate to servere)
，積分為
4
：具
51 ~
75%
程度的組織病理變化。
(6)
程度為嚴重
(servere)
，積分為
5
：具
76 ~ 100%
程度的
組織病理變化。
結果
一、臨床毒性症狀與死亡率：臨床症
狀上可見含益達胺農藥之各試驗組均出現
顫抖
(trembling)
等神經症狀，該神經症狀
約於投藥後
2
至
3 h
內出現，但隔夜後症狀
即回復，該神經症狀為可逆性表現，但含
益達胺農藥之各試驗組間其神經症狀表現
程度上並無差異；死亡率上可見含四氯異
苯腈農藥之各試驗組均出現約
20%
之死亡
率，但同時混合投予
3
種農藥之致死率反
而降至
10%
，各試驗組動物死亡率詳如表
一所示。
二、肝相對重量：雄鼠肝相對重量上
顯示含菲克利之各試驗組包括混合四氯異
苯腈
(0.045
±
0.004%)
、混合益達胺
(0.058
±
0.007%)
及 單 一 菲 克 利 處 理 組
(0.051
±
0.009%)
與對照組
(0.034
±
0.004%)
相較均明
顯增加肝相對重量
(
P
< 0.05)
，但同時混合
投予
3
種農藥之試驗組
(0.048
±
0.008%)
並