136 / 220
臺灣農藥科學 第
1
期
134
P. cichorii
之生理生化特性進行比較，結果
顯示供試菌株與
P. syringae
的生理生化特性
相近
(
表三
)
。
四、
Biolog
鑑定系統測試
供試菌株分別以
Biolog Identification Sys-
tem
之
GN2
資料庫
(Biolog 6.1
版
)
進行比對
判讀。培養
24 h
的結果，各菌株與
P. syringae
pv.
antirrhini
最為相近，其相似值依序分別為
0.549
、
0.882
、
0.893
、
0.528
、
0.829
及
0.583
。
五、
PCR
檢測鑑定
根據
GenBank
上所登錄
P. syringae
pv.
antirrhini
的
16S-23S ITS
序列設計引子對
(Pse-ITS-F/R)
，應用此引子對進行
PCR
檢
測。各供試菌株及對照菌株：
P. syringae
pv.
syringae
、
P. syringae
pv.
tomato
、
P. syringae
pv.
tabaci
及
P. syringae
pv.
phaseolicola
等對照
菌，皆可產生約
420 bp
大小
DNA
片段及無
菌水對照組無基因產物
(
圖二
)
，確認
6
個
供試菌株為
P. syringae
。
六、
16S-23S ITS
定序及親緣關係
鑑定
供試菌株經
PCR
增幅所得之片段進
行
DNA
定序，將序列資料上傳至
NCBI
圖一、
(A)
田間茼蒿細菌性葉斑病之病徵；
(B)
近照顯示葉背呈現大型不規則褐色斑。
Fig. 1.
(A) Symptoms of bacterial leaf spot on
Chrysanthemum coronarium
field specimens (red
arrows). (B) A close-up image showing irregular brown spots on the abaxial surface of a
leaf.