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抗嘉磷塞雜草之變異與鑑定
75
20
μ
L
，置於
37
℃水浴反應
1.5 h
，再於
2.0%
agarose
中進行電泳分析。
利用建立的單核苷酸多型性檢測技術，
鑑定採自臺南市關廟區
(TA1)
；高雄市田寮
區
(KH1)
、鳳山市
(KH2)
、美濃區
(KH3)
、
左 鎮 區
(KH4)
、 燕 巢 區
(KH5)
、 旗 山 區
(KH6)
；屏東縣里港鄉
(PT1)
、內埔鄉
(PT2)
、
春日鄉
(PT3)
、滿州鄉
(PT4)
等
11
地區農地
的繖花龍吐珠，各樣品為隨機採集的
12 ~
16
葉齡繖花龍吐珠，植株皆具有含土根系，
並栽種於盆缽，置於溫室培育備用。
結果
一、繖花龍吐珠對嘉磷塞之耐受
性
臺中市及高雄縣果園採集對嘉磷塞不同
耐受性的繖花龍吐珠種子，培育至
12 ~ 15
葉齡，分別噴施
0.10 ~ 26.24 kg a.e./ha
嘉磷
塞劑量，施藥後第
3
日開始，對藥劑敏感的
植株在劑量
0.20 kg a.e./ha
處理下，頂芽組織
開始出現不同程度黃化、捲曲等傷害徵狀；
噴施
0.82 kg a.e./ha
劑量的植株於第
5
日出現
較明顯的傷害；施用
0.82 kg a.e./ha
劑量處
理後第
14
日，感性植株於即全株死亡。抗
性植株部分則生長被抑制、節間變短、葉片
變小。抗性植株在劑量
13.12 kg a.e./ha
處理
下，才出現較明顯的傷害，嘉磷塞劑量高達
26.24 kg a.e./ha
才會造成全株死亡。以
log-
logistic
公式估算以乾重為基礎之
ED
50
值，
感及抗性繖花龍吐珠
ED
50
值分別為
0.46
及
4.58 kg a.e./ha
，顯示抗性植株對嘉磷塞的耐
受性約為感性植株的
10
倍
(
圖一
)
。
二、嘉磷塞噴施繖花龍吐珠後之
莽草酸含量變化
抗及感性繖花龍吐珠噴施次致死劑量
0.82 kg a.e./ha
嘉磷塞，進行幼葉莽草酸含量
分析。於藥劑處理後
10
日內採取頂梢第
1
~ 3
葉片，測定莽草酸含量。結果顯示抗性
植株於施藥後第
2
日莽草酸含量增加，達
1.33
μ
mol/g
，為未施藥抗性植株的
3.3
倍
(
圖
二
)
，隨後於第
4
日含量開始下降，至第
10
日莽草酸含量為
0.38
μ
mol/g
，僅略高於未
施藥抗性植株含量。而感性植株於施藥後
第
2
日莽草酸含量大幅增加至
2.3
μ
mol/g
，
為未施藥感性植株的
75
倍，隨後第
8
日增
為
115
倍，含量未出現明顯的下降，施藥後
第
10
日感性繖花龍吐珠莽草酸含量為抗性
植株的
36.5
倍
(
圖二
)
。
三、抗及感性繖花龍吐珠
EPSPS
基因序列之差異性
萃取抗及感性繖花龍吐珠幼葉總
RNA
，以
EPSPS-F1
及
EPSPS-R1
為引子
(
表
一
)
，利用
RT-PCR
技術進行
EPSPS
基因選
殖，結果皆可增幅出
1,156 bp
的核酸片段
(
圖三
A)
，將此核酸片段經解序後與
NCBI
GeneBank
中之高等植物
EPSPS
核酸序列
比對，確證此
1,156 bp
核酸片段為繖花龍
吐珠
EPSPS
基因的部分
cDNA
。再於此序
列中設計專一性
GSP1
及
GSP2
引子，利用