臺灣農藥科學 第一期

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臺灣農藥科學 第 1 期 78
基酸，由對嘉磷塞感性植株的脯氨酸 (pro-
line) 變異為抗性植株絲氨酸 (serine)，依其
基因序列單一鹼基對差異處，即第 320 鹼基
胞嘧啶 (cytosine) 及胸腺嘧啶 (thymine) 設計
抗性專一性引子，經由 PCR 測定，抗性繖
花龍吐珠可明顯增幅一 350 bp 的核酸條帶
( 圖七 A)，感性株則無此增幅片段。針對
11 處高屏農地繖花龍吐珠，分別萃取其基
因組 DNA，經專一性引子之單核苷酸多型
性技術檢測，結果共有 4 株為抗性株，可
增幅 350 bp 核酸條帶，分別為高雄市燕巢
區及鳳山市；屏東縣里港鄉及春日鄉的繖
花龍吐珠 ( 圖七 B)。另利用 PCR-RFLP 鑑定
結果亦為此 4 株為抗性株，無法經由 HaeIII
酵素切為 332 bp 及 163 bp 2 片段 ( 圖八 ) ，
顯示此等檢測樣品的 EPSPS 基因序列中，
無可被 HaeIII 限制酶作用的 5’-GG/CC-3’
序列，此等差異亦為抗及感性生物型可鑑
別之處。
圖三、抗及感性繖花龍吐珠利用 (A) RT-PCR 及 (B) RACE 技術增幅 EPSPS 核酸。RT-PCR
利用的引子為 EPSPS-F1/EPSPS-R1，RACE 利用的引子為 EPSPS-F2/EPSPS-R2，第 1
~ 2 欄為抗性繖花龍吐珠，第 3 ~ 4 欄為感性繖花龍吐珠。
Fig. 3. PCR products of EPSPS from leaves of Hedyotis corymbosa that were amplified by (A) RT-
PCR using EPSPS-F1/EPSPS-R1 primers or (B) RACE using EPSPS-F2/EPSPS-R2 primers.
Lanes 1 and 2 show glyphosate-resistant H. corymbosa, lanes 3 and 4 show glyphosate-
susceptible H. corymbosa.